原指使敌人的间谍为我所用，或使敌人获取假情报而有利于我的计策。后指用计谋离间敌人引起内讧。
【原典】
疑中之疑①。比之自内，不自失也②。
【注释】
①疑中之疑：句意为在疑阵中再布疑阵。
②比之自内，不自失也：语出《易经·比》卦。比，卦名，本卦为异卦相叠（坤下坎上）。本卦上卦为坎为为相依相赖，故名“比”。比，亲比，亲密相依。本纷六二。《象》辞：“比之自内，不自失也。”
此计运用此象理，是说在布下一重重的疑阵之后，能使来自敌内部的间谍归顺于我。
【按语】
间者，使敌自相疑忌也；反间者，因敌之间而间之也。如燕昭王薨，惠王自为太子时，不快于乐毅。田单乃纵反间曰：“乐毅与燕王有隙，畏诛，欲连兵王齐，齐人未附。故且缓攻即墨，以待其事。齐人唯恐他将来，即墨残矣。惠王闻之，即使骑劫代将，毅遂奔赵。又如周瑜利用曹操间谍，以间其将；陈平以金纵反间于楚军，间范增，楚王疑而去之。亦疑中之疑之局也。
【故事】
反间计，主要有二方面的含义：一是巧妙地利用敌方的间谍为我方所用，一是当敌方某个将领对本方构成威胁时，故意捏造他为我所用的假证据，以离间对方领导层内部之间的良好关系，使敌方高层最终舍弃这个将领，为我方拔去“眼中钉”。孙子说，“知之必在于反间，故反间不可不厚也。”，唐人杜牧在《十一家注孙子》中说，“敌有间来窥我，我必先知之，或厚赂诱之，反为我用；或佯为不觉，示以伪情而纵之，则敌人之间，反为我用也。”。
战国时，齐国大将田忌、段朋率大军攻打鲁国。他们听说鲁国的将领是名不见经传的吴起时，就很不以为然。两军对垒，鲁军黯然不动，田忌暗地里派人去鲁营打探实情，只见吴起正在同军中最低等的士兵们席地而坐、分羹同食，田忌听报，大笑说：“将尊则士畏，士畏则战力，吴起竟然如此低贱，怎么能威服将士呢，我毫无顾虑了。”。田忌又派亲信张丑以谈和为名，前去鲁营探听情报。吴起很清楚他们的意图，就故意把精锐的部队藏于后营，不给张丑发觉；而让他特意看到鲁营里到处是老弱病残的士兵，士气萎靡不振；吴起也装作奴颜婢膝的样子，请求与齐军议和。田忌听完张丑的汇报后，更加轻视鲁军，从而放松了应有的警惕性。吴起于深夜里，亲率一队精锐的兵马前去齐营偷袭，乘混乱时放起大火，齐军拼命突围，又被鲁军的伏兵掩杀，齐军大败而归。逃回齐国后，田忌责怪张丑的情报有假，张丑这才知道：是吴起的“反间计”害了他和齐军，田忌万般感叹道：“吴起用兵，有比孙武、穰苴，我不如也。”。